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      2. 小鼠GATA結合蛋白4(GATA4)ELISA試劑盒

        發布時間:2024-04-18
        小鼠gata結合蛋白4(gata4)elisa試劑盒操作方法如圖展示:
        小鼠gata結合蛋白4(gata4)elisa試劑盒雙抗體夾心法
        1.包被:用0.05mph9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質含量為1~10μg/ml。在每個聚苯乙烯板的反應孔中加0.1ml,4℃過液。次日,棄去孔內溶液,用洗滌緩沖液洗3次,每次3分鐘。(簡稱洗滌,下同)。
        2. 加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應孔中,置37℃孵育1小時。然后洗滌。(同時做空白孔,陰性對照孔及陽性對照孔)。
        3. 加酶標抗體:于各反應孔中,加入新鮮稀釋的酶標抗體(經滴定后的稀釋度)0.1ml。37℃孵育0.5~1小時,洗滌。
        4. 加底物液顯色:于各反應孔中加入臨時配制的tmb底物溶液0.1ml,37℃10~30分鐘。
        5. 終止反應:于各反應孔中加入2m硫酸0.05ml。
        6. 結果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結果:反應孔內顏色越深,陽性程度越強,陰性反應為無色或極淺,依據所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號表示。也可測od值:在elisa檢測儀上,于450nm(若以abts顯色,則410nm)處,以空白對照孔調零后測各孔od值,若大于規定的陰性對照od值的2.1倍,即為陽性。
        小鼠gata結合蛋白4(gata4)elisa試劑盒間接法
        1.用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1~10μg/ml,每孔加0.1ml,4℃過液;
        2.次日洗滌3次;
        3.加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.1ml于上述已包被之反應孔中,置37℃孵育1小時,洗滌;
        4.(同時做空白、陰性及陽性孔對照)于反應孔中,加入新鮮稀釋的酶標第二抗體(抗抗體)0.1ml;
        5.37℃孵育35-60分鐘,洗滌;
        6.’后一遍用ddw洗滌。
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