決定顯微鏡分辨率的主要因素也稱為顯微鏡分辨率。然而，放大倍數和清晰度等物理參數與現場金相顯微鏡的分辨率密切相關。
現場金相顯微鏡的成像原理如下
我們知道場光學顯微鏡是一個復雜的同軸光學系統，主要部件是光源、物鏡光圈等。目鏡只是一個光學元件，可以直接放大并投射到屏幕上(包括人類的視網膜)。光源可以是非相干光源，例如太陽光和光，或者相干光源，例如點光源。
19世紀70年代，德國學者阿貝奠定了金相顯微鏡成像理論的基礎。在現代物理光學中，通過新的實驗進一步闡明了阿貝成像理論中光譜變換原理的實質。
物鏡是現場金相顯微鏡光路中的關鍵成像元件。光源和物鏡前透鏡之間有許多平面，物鏡后有相應的共軛平面。然而，根據阿貝理論，在現場金相顯微鏡中，物平面o和相應的共軛平面是像平面o′和光源i′，而共軛平面i′對應于物平面o′是成像系統中重要的一對平面。為了了解尼康顯微鏡的成像過程，有必要研究這兩個共軛平面上的光學過程。
在現場金相顯微鏡中，光源在孔徑光闌限制的入射光束角度范圍內直接通過聚光器。光闌平面上的光在物鏡后面的焦平面上或焦平面附近成像。阿貝說，這張照片是現場金相顯微鏡光路中的一張照片，我們不能忽視一成像質量的重要性。這意味著光學顯微鏡下的光束孔徑適合野外觀察。其次，確定樣品三維結構不同平面的成像光?？傊?，確定了現場金相顯微鏡中物體圖像的介質對比度和物體圖像輪廓的清晰度。
如果將樣品插入現場金相顯微鏡的成像光路，一個成像系統將被破壞，光圈圖像在試管中不再可見。在這一點上，標本的細節成為一個光源，并在視網膜或目鏡后面的屏幕上成像。這是現場金相顯微鏡的二張照片，幾何光學不能解釋樣品細節的成像過程。由于成像光在該平面上的折射、雙折射、衍射和散射，光強分布將隨著樣品的細節而變化，光學信息將被轉換并投影到屏幕上。在各種光學顯微鏡中，根據這一原理，各種干涉成分被用于將樣品的細節映射到具有亮和暗相位對比度或暗光對比度的物體圖像上，這是各種顯微鏡的成像原理。